葡萄籽中的黄酮和白藜芦醇含量测定

葡萄籽中的黄酮和白藜芦醇含量测定
葡萄的果实可酿酒或加工成其它产品如葡萄干、果汁、果冻等.葡萄酿酒的下脚料--葡萄籽--一般当作废弃物.根据近年的科学研究,葡萄籽不仅含有各种矿物元素和维生素,其所含成分的抗氧化、抗炎、抗凝血等活性引起了科学研究者的关注.本文测定了葡萄籽的功效成分黄酮和白藜芦醇.
1 材料与方法
1.1 材料
将酿酒后的葡萄皮渣烘干或晒干,从中分离并筛选出葡萄籽,粉碎至粗粉供测试用.同时取未经酿酒的葡萄籽经烘干后,制成粗粉作为对照.
1.2 方法
1.2.1 脂肪酸含量测定 称取葡萄籽粗粉适量,用1∶1甲醇-氯仿浸提24～48h,然后用氯仿提取,在水浴上挥干氯仿,残液用氮气吹干,再加适量氯仿溶解,用SP-502气相色谱仪以脂肪酸标准品作为对照测定脂肪酸,脂肪测定采用索氏提取法.
1.2.2 总黄酮含量测定 称取适量葡萄籽粗粉,经60℃干燥6h,在索氏提取器中用乙醚提取至提取液无色,回收乙醚,再用甲醇提取至提取液无色,移入容量瓶中,以甲醇定容至刻度,同时以芦丁作标准对照,在波长500nm处测定吸光度[1].
1.2.3 白藜芦醇含量测定 分别称取适量经烘干的葡萄籽粉,置索氏提取器中,加无水乙醇回流6h,蒸干溶剂,用无水乙醇定容至刻度,测定前,将样品经流动相溶剂稀释,用高效液相色谱仪测定[2],以白藜芦醇作标准对照,另取新鲜葡萄籽、皮进行对比测定.
2 结果
2.1 脂肪及脂肪酸
葡萄籽中总脂肪含量为150g/kg.饱和脂肪酸占总脂肪酸的11%,不饱和脂肪酸占89%,其中亚油酸和油酸分别占脂肪酸总量的73.03%和15.85%.
2.2 总黄酮
根据芦丁标准的吸光度得回归线方程
=0.0513+1.9777X
r=0.9914,P<0.0001.
经计算得葡萄籽中总黄酮含量为130.6mg/g.
2.3 白藜芦醇
按白藜芦醇标准的峰高计算,葡萄籽中白藜芦醇的含量为1.17 mg/g,未经酿酒的葡萄籽及葡萄皮中白藜芦醇分别为12.45mg/g和3.44mg/g.
3 讨论
本次分析结果表明,葡萄籽脂肪含量较高,与大豆、麦胚脂肪含量相近[3],其中人体必需脂肪酸亚油酸含量为73%,比一般的食用油,甚至药用油(核桃油,红花油)都高[4],是难得的高级营养油.亚油酸在脂类代谢过程中具有重要作用,对防治人群循环系统的疾病具有重要意义.
葡萄籽中黄酮含量极为丰富,高于山楂干果(0.81～0.93 mg/g)[5].近年研究表明,黄酮类化合物对急性实验性脑缺血引起的脑电图改变和缺血、缺氧有明显的保护作用,并且具有扩张血管,抑制EB病毒等作用[6].
本实验结果显示:葡萄籽也是白藜芦醇化合物的良好来源.特别是未经酿酒的葡萄籽,其白藜芦醇含量为酿酒后葡萄籽的10倍.这可能是在酿酒和干燥过程中丢失所致.据报道:白藜芦醇在癌的起始、促进和发展三个主要阶段均有化学防癌活性.研究还发现,白藜芦醇通过抗氧化和抗突变作用发挥其活性,并可诱导第二期药代酶(抗起始活性).也有报道白藜芦醇对心血管系统、肝脏具有保护作用[7,8].